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第一章 基本实验操作及常用仪器使用1

第一节 常用研究技术1

第二节 基本实验操作24

第三节 常用仪器使用32

第四节 实验室规则及安全防护43

第五节 如何撰写实验报告44

第二章 经典验证性实验46

第一节 蛋白质定量分析实验46

实验一 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量46

实验二 双缩脲法测定血清蛋白质含量49

实验三 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量50

实验四 紫外分光光度法测定蛋白质浓度52

实验五 BCA法测定蛋白质浓度54

第二节 层析实验56

实验六 纸层析法观察转氨基作用56

实验七 葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白58

实验八 离子交换层析分离混合氨基酸60

实验九 薄层层析分离鉴定氨基酸61

第三节 电泳实验64

实验十 血清醋酸纤维薄膜电泳64

实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶67

实验十二 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量72

第四节 酶学实验74

实验十三 血清碱性磷酸酶活性测定75

实验十四 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定77

实验十五 胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素79

实验十六 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用82

实验十七 Hg 2＋对脲酶的抑制作用84

实验十八 酶米氏常数的测定86

第五节 糖与脂质87

实验十九 血糖浓度的测定88

实验二十 肾上腺素对血糖浓度的影响90

实验二十一 血清三酰甘油浓度测定91

实验二十二 血清总胆固醇浓度测定94

实验二十三 血清载脂蛋白apoAl的测定98

实验二十四 血清过氧化脂质的测定99

实验二十五 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳101

第六节 核酸分离纯化技术102

实验二十六 基因组DNA的提取制备与检测102

实验二十七 全血基因组DNA的试剂盒法提取制备与检测106

实验二十八 总RNA的提取制备与检测108

实验二十九 质粒DNA的提取制备与检测111

实验三十 动物组织核酸的提取及成分鉴定115

第七节 PCR技术117

实验三十一 常规PCR技术117

实验三十二 定量PCR技术120

第八节 基因克隆技术123

实验三十三 凝胶中DNA片断的纯化回收123

实验三十四DNA的限制性酶切与电泳124

实验三十五DNA连接实验127

实验三十六 感受态细胞的制备130

实验三十七 重组DNA转化与蓝白斑筛选131

第九节 分子杂交与印迹技术133

实验三十八 核酸原位杂交133

实验三十九Southern印迹杂交139

实验四十Northern印迹杂交142

实验四十一Western印迹145

第十节 细胞结构147

实验四十二 动植物细胞的基本形态与结构及细胞显微测量147

实验四十三 细胞内几种细胞器的观察151

实验四十四 小白鼠巨噬细胞吞噬实验152

实验四十五 细胞内几种化学成分的显示153

实验四十六 细胞骨架系统的显示与观察155

实验四十七 细胞膜的通透性的观察157

第十一节 细胞增殖158

实验四十八 细胞融合实验158

实验四十九 细胞有丝分裂观察159

实验五十 细胞原代培养161

实验五十一 细胞传代培养163

实验五十二 培养细胞的冻存、复苏与运输163

第十二节 医学遗传164

实验五十三 人类某些遗传性状的观察及皮肤纹理分析165

实验五十四 人类染色体照片核型分析171

实验五十五 染色体G显带染色体的核型分析173

实验五十六 人类染色体镜下核型分析176

第三章 综合性实验178

实验一 血清γ-球蛋白的分离纯化及鉴定178

实验二 碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究183

实验三 hCS基因在大肠埃希菌中的表达、纯化及鉴定187

实验四 hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定192

实验五 荧光原位杂交实验195

实验六 用双荧光素酶报告基因检测启动子活性198

实验七 电泳迁移阻滞实验201

实验八 染色质免疫沉淀205

实验九 蛋白质双向电泳209

实验十 肝癌组织的代谢组学分析214

实验十一 酵母双杂交实验218

实验十二 RNA干扰实验220

实验十三 人类外周血染色体标本的制备观察224

实验十四 人类恶性肿瘤染色体标本的制备观察225

实验十五 羊水细胞培养及染色体标本的制备观察226

实验十六 人精子染色体标本制备228

实验十七 绿色荧光蛋白标记的融合蛋白转染及观察230

第四章 创新性实验231

实验一 重要蛋白质或酶的分离纯化231

实验二 家族性高胆固醇血症的诊断231

实验三 血友病的分子诊断233

实验四RNA干扰技术靶向沉默目的基因233

实验五 家系调查和遗传病的系谱分析234

实验六 药物诱导肿瘤细胞凋亡的检测实验236

主要参考文献237